一、操作程序簡(jiǎn)述

1濕法分析包括下列內(nèi)容：①濁度，②凝集；②精子計(jì)數(shù)及其活動(dòng)力評(píng)估o

2．活動(dòng)擺子百分率及其動(dòng)力學(xué)測(cè)定①主觀方法；②客觀方法。奧林巴斯顯微鏡

3．稿子計(jì)數(shù)①血細(xì)胞計(jì)數(shù)器；②Msrkler計(jì)數(shù)池；③計(jì)算機(jī)輔助的精液分析（con-Puter-assistedsemenanalysis,CASA）。

4．制備精液讀片桔液涂片、精液染色、形態(tài)學(xué)分析。

在確定精子數(shù)量和活動(dòng)力過(guò)程中，無(wú)論采用何種技術(shù)，對(duì)每一個(gè)精液樣品均需用濕法或“濕操作”．此法將使檢驗(yàn)人員對(duì)稿于計(jì)致、活動(dòng)情況和有關(guān)動(dòng)力學(xué)具有一個(gè)初步的主觀印象，并可測(cè)定濁度和強(qiáng)度；在測(cè)定稿子計(jì)數(shù)及其活動(dòng)力過(guò)程中，溫度顯得很重要。顯然，37°是*選擇；然而，如缺乏調(diào)節(jié)溫度的顯微鏡操作臺(tái)，整個(gè)分析過(guò)程要在此條件下完成是不可能的。通常．精液分析在室溫中進(jìn)行。正如人們所知．室溫變化范圍很大，因此，必須盡量控制操作區(qū)域的溫度。

（一）方法

精液*液化后，充分混勻，加一滴未稀釋桔液于干凈玻片上，蓋上蓋玻片。也可用自動(dòng)加樣器吸lo微升精濃加至載玻上以提高測(cè)定的可重復(fù)性。在放大200—400倍（高倍鏡）的情況下觀察20個(gè)視野，評(píng)價(jià)活動(dòng)稻子的百分率、相對(duì)運(yùn)動(dòng)速度和方向以及每一高倍視野下的精于數(shù)，評(píng)價(jià)其濁度和是否有凝塊，確定“圓形細(xì)胞”（未成熟微生物細(xì)胞和白細(xì)胞）的百分率。奧林巴斯生物顯微鏡

（二）濁度

顯然，成熟館子在精掖中占多數(shù)。但有時(shí)也會(huì)發(fā)現(xiàn)其他細(xì)胞或碎片。來(lái)自男性生殖道的亡皮細(xì)胞也會(huì)存在于精液中。在高倍鏡下，偶爾發(fā)現(xiàn)上皮細(xì)胞并非病理指征。但息尿道炎的男子其棺液中可出現(xiàn)大量上皮細(xì)胞；有時(shí)亦可見(jiàn)陰道源性的上皮細(xì)胞，這種情況表明俏液樣品是經(jīng)性交中斷法收集的．此類細(xì)胞應(yīng)在報(bào)告單上注明。北京奧林巴斯顯微鏡

不成熟的病原茵細(xì)胞和白細(xì)胞也常在精液中出現(xiàn)，在染色破片上難以區(qū)別，而應(yīng)用濕法操作法則更不可能。通常用巴氏（Papnicolaou，PAP）染色來(lái)觀察這種“圓形細(xì)胞“（大于或等于成熟稻子的10％）；而濕法分析有助于確定哪些樣本需用這一方法進(jìn)一步制備。應(yīng)對(duì)白細(xì)胞的確切數(shù)目和不成熟病原茵的百分串加以確定和記錄（詳見(jiàn)后述）。

在精液中，還可能出現(xiàn)其他顆粒性物質(zhì)如梢膚結(jié)晶、滑石粉和殺桔劑顆粒，如發(fā)現(xiàn)量很大，則應(yīng)加以記錄。粗大茵體、毛滴蟲(chóng)、念珠菌更應(yīng)加以報(bào)告。

（三）凝集

徠卡顯微鏡在某些（非全部）含抗精子抗體的桔液樣本中，精于可能發(fā)生自發(fā)性凝集，應(yīng)在主觀判斷的基礎(chǔ)上加以報(bào)告并記錄凝集類型和程度，凝集程度的評(píng)價(jià)用0-Ⅳ表示（表44）。精子凝集方式注明為：頭—頭、頭—尾、尾—尾或混合型。有時(shí)出現(xiàn)格子粘附于碎片或其他顆粒性物質(zhì)的現(xiàn)象，應(yīng)與真性凝集區(qū)別開(kāi)來(lái)。這種現(xiàn)象除非根嚴(yán)重，否則一般不作報(bào)告。出現(xiàn)精于凝集提示應(yīng)作特異性抗精子抗體的檢測(cè)（見(jiàn)有關(guān)章節(jié)）。

（四）評(píng)估精于數(shù)、活動(dòng)率及其動(dòng)力學(xué)

在精液分析報(bào)告中應(yīng)記錄棺子數(shù)，避免出現(xiàn)少數(shù)、幾個(gè)、很多、大量館子等主觀性估計(jì)。但是，如果每高倍視野觀察到大量精子而實(shí)際計(jì)數(shù)所反映數(shù)量有所下降，應(yīng)該懷疑結(jié)果的難確性，并重新化驗(yàn)；徠卡顯微鏡此外，還應(yīng)對(duì)精子活動(dòng)串（25％、50％、75％或大于80％）和動(dòng)力學(xué)特征（緩櫻隨意運(yùn)動(dòng)和快速直線運(yùn)動(dòng)）作出主觀評(píng)價(jià)，并與以客觀方法測(cè)定的結(jié)果相比較。顯然這種方法的主觀性很強(qiáng)，在測(cè)定者之間甚至同一測(cè)定者身上易產(chǎn)生差異。然而，這些“主觀的粗略分析”常會(huì)提示客觀分析方法的潛在錯(cuò)誤。